2×热启动基因分型PCR预混液（含染料）
产品名称： 2×热启动基因分型PCR预混液（含染料）
英文名称： 2×HotStart Genotyping PCR Master Mix (With Dye)
产品编号： N132004
产品价格： null
产品产地： 美国
品牌商标： Arcegen
更新时间： 2025-05-15T13:28:36
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 1 mL | 60.0 |
| 5×1 mL | 250.0 |
| 50×1 mL | 2000.0 |
| 100×1 mL | 3500.0 |
- 联系人 : 钟珍
- 地址 : 申江南路4388号1幢2层208室
- 邮编 : 201314
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****6764 点击查看
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- 邮箱 : zhongz@magibagbio.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本品是即用型的PCR预混合溶液，含有HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，可以高通量操作并提高实验结果的重现性。HotStart Taq DNA Polymerase是经过配体修饰的热稳定Taq DNA Polymerase，该配体可以随温度变化来调节DNA聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭，经95°C加热后活性才被释放。Arcegen™ HotStart DNA Polymerase的激活时间只需要2-3 min，兼容现有的PCR程序。本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增，可以有效地进行基因分型实验。
产品规格
|
产品货号 |
N132004E |
N132004S |
N132004M |
N132004L |
|
产品规格 |
1 mL |
5×1 mL |
50×1 mL |
100×1 mL |
产品储存
-25~-15℃储存，有效期2年。干冰运输。
产品应用
本产品主要应用于小鼠基因型鉴定。
操作注意
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途！
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII，37°C下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：20 μL本品和1 μg λDNA，37°C温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测：50 μL体系中，加入25 μL本品，以无菌ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。30个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
操作说明
1. 推荐PCR反应体系
表1 PCR反应体系
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
2×HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye) |
25 |
1× |
|
模板 |
x |
- |
|
正向引物F（10 μM） |
2 |
0.4 μM |
|
反向引物R（10 μM） |
2 |
0.4 μM |
|
ddH2O |
Up to 50 |
- |
不同模板的推荐使用量：
表2 不同模板的推荐使用量
|
模板种类 |
使用量范围（50 μL反应体系） |
|
基因组DNA |
50–100 ng |
|
质粒DNA |
0.1-20 ng |
|
cDNA |
1-5 μL (不超过反应体系的1/10) |
2. 反应程序
表3 PCR反应程序
|
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
变性 |
95℃ |
30 sec |
35 |
|
退火* |
50-60℃ |
30 sec |
|
|
延伸** |
72℃ |
30 sec/kb |
|
|
终延伸 |
72℃ |
10 min |
1 |
【注】：
*推荐退火温度和时间：退火温度推荐使用50-60℃。退火时间推荐设置为30 sec，可以在20-30 sec内调节。可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
**延伸温度和时间：温度推荐使用72℃。时间推荐使用30-60 sec/kb。
扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。